(1) 選擇合適的pH各種微生物正常生長(zhǎng)均需要有合適pH,一般霉菌和酵母菌比較適于微酸性環(huán)境,放線(xiàn)菌和細(xì)菌適于中性或微堿性環(huán)境。為此,當(dāng)培養(yǎng)基配制好后,若pH不合適,必須加以調(diào)節(jié)。另外,一個(gè)須注意問(wèn)題是:高碳氮比的培養(yǎng)基在菌體生長(zhǎng)過(guò)程中易使pH變低,低碳氯比的培養(yǎng)基在菌體生長(zhǎng)過(guò)程中易使pH變高。這時(shí)可用加酸堿溶液、加緩沖劑、加生理酸堿性鹽進(jìn)行調(diào)節(jié),同時(shí)以菌體對(duì)各種營(yíng)養(yǎng)成分的利用速度來(lái)考慮培養(yǎng)基的組成。(2)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度及配比合適培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度合適時(shí)菌體才能生長(zhǎng)良好。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度過(guò)低時(shí)不能滿(mǎn)足菌體正常生長(zhǎng)所需,例如氮源不足,則菌體生長(zhǎng)過(guò)于緩慢,而培養(yǎng)基中的碳源供應(yīng)不是時(shí),容易引起菌體衰老和自溶。濃度過(guò)高時(shí)則可能對(duì)菌體生長(zhǎng)起抑制作用,例如高濃度糖類(lèi)物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽等不僅不能維持和促進(jìn)菌體的生長(zhǎng),反而起到抑菌或殺菌作用??傮w來(lái)講,碳源物質(zhì)濃度應(yīng)以略稀薄為宜。另外,培養(yǎng)基中各營(yíng)養(yǎng)物間濃度配比也直接影響微生物生長(zhǎng)繁殖,其中碳氯比( C/N)在發(fā)酵工業(yè)中尤其重要,不同菌種、不同類(lèi)型培養(yǎng)基的碳氮比是不同的。(3) 氧化還原電位的影響絕大多數(shù)微生物來(lái)說(shuō),培養(yǎng)基的氧化還原電位一般對(duì)其生長(zhǎng)的影響不大,即適合它們生長(zhǎng)的氧化還原電位范圍較廣。但對(duì)于厭氧菌,由于氧的存在對(duì)其有毒害作用,因而往往在培養(yǎng)基中加入還原劑以降低氧化還原電位。在配制培養(yǎng)基時(shí),除應(yīng)注意以上幾條原則外,還要考慮到營(yíng)養(yǎng)成分的加入順序,為避免生成沉淀而造成營(yíng)養(yǎng)成分的損失,加入的順序一般為先加入緩沖化合物,溶解后加入主要物質(zhì),然后加入維生素、氨基酸等生長(zhǎng)素類(lèi)的物質(zhì)。(4) 選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)雖然所有微生物生長(zhǎng)繁殖均需要培養(yǎng)基含有碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子、水等,但由于微生物營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型的復(fù)雜性,不同微生物所需要培養(yǎng)基成分不相同。要確定一個(gè)合適培養(yǎng)基,需要了解生產(chǎn)用菌種來(lái)源、生理生化特性和一般營(yíng)養(yǎng)要求,根據(jù)不同生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)條件、生物合成的代謝途徑、代謝產(chǎn)物的化學(xué)性質(zhì)等確定培養(yǎng)基。自養(yǎng)型微生物培養(yǎng)基完全由簡(jiǎn)單無(wú)機(jī)物組成,不需要專(zhuān)門(mén)加入其他碳源物質(zhì),例如培養(yǎng)自養(yǎng)型的氧化硫硫桿菌的培養(yǎng)基。因?yàn)樽责B(yǎng)型微生物能從簡(jiǎn)單無(wú)機(jī)物合成自身需要的糖類(lèi)、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、核酸、維生素等復(fù)雜有機(jī)物。對(duì)光能自養(yǎng)型微生物而言,除需要各類(lèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外,還需光照提供能源。培養(yǎng)異養(yǎng)型微生物需要在培養(yǎng)基中添加有機(jī)物,而且不同類(lèi)型異養(yǎng)型微生物的營(yíng)養(yǎng)要求差別很大,因此其培養(yǎng)基組成也相差很遠(yuǎn)。例如培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基組成比較簡(jiǎn)單,而培養(yǎng)腸膜明串珠菌需要在培養(yǎng)基中添加多達(dá)33種生長(zhǎng)因子。本文參考《發(fā)酵工程原理與技術(shù)》一書(shū)。
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